1.2.3 蛋白浓度定量 制备标准品；样品蛋白浓度测量(微孔板测定)；每孔加标准/样品5 μl；每孔再加入250 μl Commassie Reagent,摇晃30 s；停止摇晃，室温下孵育10 min；在595 nm测吸光值；将其他标准/样品管中测值减去空白管测值；画标准曲线，并依次得到样品管浓度。

    1.3 数据分析与统计 所有数据以(x±s)表示,采用方差分析及Dunnett t 检验分析(Prism 3.0 统计软件),P0.05 vs空白对照组)；而预先加入SQ-22536、H-89后再加入ISO，可见ISO增加 eNOS活性的作用受到明显抑制(12.1±3.53)%、(4.73±2.19)%,(P

    3 讨论

    eNOS是一种结构型的酶，它的氧化酶区和还原酶区含有多种辅助因子结合位点，钙调素(CaM)与eNOS结合后作为一个分子开关，允许电子流从NOS羟基端还原酶区流向氨基端含血红素区域，为eNOS生成NO所必需。传统的内皮依赖性血管扩张物质如乙酰胆碱、组胺等都是通过提高细胞内游离Ca²⁺浓度 ......